Préparer une boîte de culture de milieu complet à proximité du bec Bunsen ainsi que la boîte ou le tube contenant l’échantillon à prélever.
2- Passer l'anse à la flamme, la laisser refroidir et avec l'autre main entrouvrir la boîte de culture ou ouvrir le tube.
3- Prélever une colonie ou une goutte de suspension avec l'anse, refermer la boîte ou le tube et prendre la boîte vierge.
4- Diviser mentalement la boîte en secteurs égaux ou s’aider d’une matrice placée sous la boîte et déposer l'échantillon en laissant traîner l'extrémité de l'anse en zig zag dans le premier secteur de la périphérie vers le centre de la boîte.
5- Repasser l'anse à la flamme, la laisser refroidir, faire tourner la boîte d'un secteur et repasser avec l'anse dans la partie supérieure du dépôt initial qu'on étalera dans le deuxième secteur comme précédemment sans croiser de nouveau le premier dépôt.
6- Procéder de la même façon pour les autres secteurs de la boîte.
7- Placer la boîte à l'étuve (25 à 30°C), posée à l'envers c'est à dire sur le couvercle.
• Résultats
Après 48 heures d'incubation, des colonies isolées sont visibles dans les derniers secteurs ensemencés